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      電轉(zhuǎn)儀celetrix

      產(chǎn)品簡(jiǎn)介

      電轉(zhuǎn)儀celetrix以及相關(guān)的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學(xué)特性、 電擊管內(nèi)的電場(chǎng)均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細(xì)胞保護(hù)作用,是獲得高效、 低 毒性細(xì)胞電轉(zhuǎn)的解決方案。

      更新時(shí)間:2024-10-08
      訪問(wèn)量:7675
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      電轉(zhuǎn)儀celetrix

      細(xì)胞電轉(zhuǎn)染(電轉(zhuǎn)),也叫細(xì)胞電穿孔(electroporation), 是把外源大分子物質(zhì)DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質(zhì)以及一些小分子等導(dǎo)入細(xì)胞膜內(nèi)部的重要方法。

      在瞬間強(qiáng)大電場(chǎng)的作用下,溶液中細(xì)胞的細(xì)胞膜具有了一定的通透性,帶電的外源物質(zhì)以類似電泳的方式進(jìn)入細(xì)胞膜。 由于細(xì)胞膜磷脂雙分子層的電阻很大,細(xì)胞外部電流場(chǎng)產(chǎn)生的細(xì)胞兩極電壓都被細(xì)胞膜承受,細(xì)胞質(zhì)內(nèi)分到的電壓可以忽略不計(jì),細(xì)胞質(zhì)內(nèi)部幾乎沒(méi)有電流,因此也決定了正常范圍內(nèi)的電轉(zhuǎn)過(guò)程中細(xì)胞毒性很小。 電場(chǎng)使DNA等物質(zhì)進(jìn)入細(xì)胞膜后只能停止在細(xì)胞膜附近,隨后細(xì)胞本身的機(jī)制可以允許這些物質(zhì)到細(xì)胞核等處。

      普通電轉(zhuǎn)能量過(guò)高可導(dǎo)致部分細(xì)胞因膜破壞而死亡,其中能存活下來(lái)的細(xì)胞內(nèi)部都不會(huì)受到電流影響,因?yàn)榧?xì)胞膜完整是細(xì)胞存活的必要條件。

      由千電轉(zhuǎn)技術(shù)依靠的是物理方法,細(xì)胞表面的分子特性對(duì)電轉(zhuǎn)影響比較小。 相比化學(xué)轉(zhuǎn)染方法和病毒載體轉(zhuǎn)染方法,電轉(zhuǎn)可以用在所有的細(xì) 胞種類上,而且容易定量控制。

       

       

      以及相關(guān)的電擊管與電轉(zhuǎn)液綜合優(yōu)化了儀器電學(xué)特性、 電擊管內(nèi)的電場(chǎng)均勻度以及電轉(zhuǎn)液的細(xì)胞保護(hù)作用,是獲得高效、 低毒性細(xì)胞電轉(zhuǎn)的解決方案。

       

      celetrix電轉(zhuǎn)儀應(yīng)用:

      •     有效的細(xì)胞:幾乎所有的真核細(xì)胞,包括所有細(xì)胞系,原代細(xì)胞,干細(xì)胞,血液和免疫類細(xì)胞,神經(jīng)細(xì)胞,植物細(xì)胞和胚胎。

      •     可以電轉(zhuǎn)的物質(zhì)包括DNA、 RNA、 siRNA、 蛋白質(zhì)等。

      •     適用實(shí)驗(yàn):瞬時(shí)或穩(wěn)定表達(dá)蛋白質(zhì)、 基因敲除與敲入、 siRNA和其他分子機(jī)制研究。

      •     科研領(lǐng)域:細(xì)胞分子生物學(xué)、 免疫學(xué)、 血液學(xué)、 神經(jīng)學(xué)、 癌癥研究、 新藥開(kāi)發(fā)等。

       

      功能強(qiáng)大   操作簡(jiǎn)單

      效率高       細(xì)胞死亡率低

      適用所有真核細(xì)胞;可以電轉(zhuǎn)DNA、RNA、siRNA、蛋白質(zhì)等;
      外觀美觀、界面簡(jiǎn)潔、操作簡(jiǎn)單。
      電脈沖參數(shù)設(shè)定方便,內(nèi)部電路反應(yīng)迅速,設(shè)定完成即可啟動(dòng),瞬間完成電轉(zhuǎn)。
      示波器功能,顯示實(shí)際通過(guò)樣品的電流波形,可視化掌控實(shí)驗(yàn)質(zhì)量。
      LED照明燈,清楚指示電擊管連接狀態(tài)。
      功率強(qiáng)大,單次高效電轉(zhuǎn)可達(dá)1000ul,可以經(jīng)濟(jì)快速的電轉(zhuǎn)大量細(xì)胞。

       

      全部過(guò)程只需5
      1、懸浮細(xì)胞(貼壁細(xì)胞先消化成單細(xì)胞狀態(tài))1000rpm離心3min。
      2、無(wú)血清細(xì)胞培養(yǎng)液洗一遍、1000rpm離心1min。
      3、重懸細(xì)胞在電轉(zhuǎn)液中,加入DNA,將細(xì)胞轉(zhuǎn)移至電擊管蓋好并放入儀器中。
      4、設(shè)定參數(shù)進(jìn)行電擊,大部分細(xì)胞系可以使用30ms單脈沖,只需改變一個(gè)電壓參數(shù)。
      5、取出細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)。

      技術(shù)參數(shù)

       

      儀器型號(hào)

       

      LE款

       

      EX款

       

      體積使用范圍

       

      20ul~200ul

       

      20ul~1000ul

       

      常用細(xì)胞量

       

      20ul

       

      0.2×106~2×106

       

      0.2×106~2×106

       

      120ul

       

      1.2×106~1.2×107

       

      1.2×106~1.2×107

       

      200ul

       

      2×106~2×107

       

      2×106~2×107

       

      600ul

       

       

      6×106~6×107

       

      1000ul

       

       

      1×107~1×108

       

      電轉(zhuǎn)脈沖電壓

       

      300V-1500V

       

      300V-1500V

       

       

      celetrix電轉(zhuǎn)儀應(yīng)用的優(yōu)勢(shì):

      Celetrix新一代電轉(zhuǎn)可以高效轉(zhuǎn)染從新鮮PBMC到刺激培養(yǎng)階段的T細(xì)胞。 與其他電轉(zhuǎn)技術(shù)相比, Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)具有效率。

      我們的技術(shù)也具有細(xì)胞存活率,并且細(xì)胞在電轉(zhuǎn)后能夠和未電轉(zhuǎn)細(xì)胞

      Celetrix電轉(zhuǎn)儀使得CAR-T, TCR-T制備、 CRISPR介導(dǎo)的基因編輯等變得容易。

       

      目前70%以上的治療性抗體蛋白都是由CHO細(xì)胞產(chǎn)生

      的,Celetrix電轉(zhuǎn)技術(shù)對(duì)CHO細(xì)胞可以達(dá)到高效穩(wěn)定

      (90%以上)的電轉(zhuǎn)效率和80%以上的存活率, 為治療 性抗體細(xì)胞轉(zhuǎn)染領(lǐng)域提供了更加高效、便捷、 穩(wěn)定的轉(zhuǎn) 染方法。

       

      利用Celetrix的電轉(zhuǎn)技術(shù)電轉(zhuǎn)Cas9蛋白和gRNA (+)或者Cas9蛋白,通過(guò)T7El核酸內(nèi)切酶檢測(cè)基因編輯效率,在APP, AAVSl, OCT4和PDCDl四個(gè)基因位點(diǎn)的編輯效率均超過(guò)50%, 其中AAVSl基因位點(diǎn)編輯效率能夠達(dá)到70%。

       

      •     電極杯中樣品與電極接觸面積大,電化學(xué)反應(yīng)產(chǎn)生毒性物質(zhì)多,并且產(chǎn)生非常多的氣泡。 氣泡對(duì)電轉(zhuǎn)的實(shí)際影響非常大。

      •     由千氣泡是絕緣體,電流只能從氣泡之間的間隙溶液流過(guò),這樣導(dǎo)致氣泡間隙的溶液中電流富集升高,處千其中的細(xì)胞因承受太高的電壓而死亡。

      電極杯內(nèi)的溶液上方受到液面效應(yīng)影響,電場(chǎng)不均勻。 靠近兩個(gè)電極1-2mm的區(qū)域由千氣泡的作用,電場(chǎng)也不均勻。電極杯內(nèi)電場(chǎng)比較均勻的較優(yōu)電轉(zhuǎn)區(qū)域很?。ㄓ覉D藍(lán)色部分),而1mm或者

      2mm的電極杯甚至可能沒(méi)有較優(yōu)電轉(zhuǎn) 區(qū)域。

      液體樣品密封呈規(guī)整圓柱形,沒(méi)有液面效應(yīng)影響電場(chǎng)均勻度。

      電極與液體接觸面積小,氣泡少又而且被壓縮,不影響電流分配。

      電擊管內(nèi)部電場(chǎng)均勻,全部都是有效電轉(zhuǎn) 區(qū)域。

       

       

       

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